top
请输入关键字
OA
病理实验室制片工作流程
2019-08-13

一、组织固定 

活体组织一旦停止血液循环和物质代谢就会因物质代谢障碍产生一系列的生物化学和组织化学的改变。固定是通过添加剂让组织中所有细胞及细胞外成分迅速死亡,以避免细胞中溶酶体成分的破坏作用,保持离体组织细胞与生活时的形态相似,并防止细菌繁殖所致的腐烂,保持蛋白质与核酸的基本结构。 

二、组织标本取材 

取材是对送检标本进行客观描述,然后将病变部位组织切成薄厚适度的小片装进脱水盒,或将小块活检组织做好标记包好后放入脱水盒的过程。 

病理切片观察是非常局限的,一般一张切片不超过2cm×1.5cm面积、3μm厚度的观察范围,因此病理取材医师若不仔细观察,未取到病变组织部位,复查医师就不能在镜下观察到病变组织,造成漏诊;取材过大、过厚则造成组织脱水、透明、浸蜡不好,导致切片质量差无法诊断;活检组织非常小,直径通常在0.1cm左右,若取材时不注意,很容易漏掉黏附于器皿或滤纸上的标本;镊子等器具清理不干净,很容易造成污染,引起复查误诊。因此取材非常重要,所有医师均需经专业培训后才可上岗。 

三、组织脱水、透明、浸蜡 

组织经固定后,含有大量水分。组织在透明浸蜡前必须进行脱水,就是用某些溶剂将组织内的水分逐渐置换出来,以利于透明剂和石蜡的渗入,这个过程称为脱水。乙醇是最常用的脱水剂,脱水力强,能使组织硬化,并能与媒浸剂二甲苯较好的融合,但容易使组织收缩、变脆,尤以无水乙醇为最甚。只有脱水环节处理的好,透明和浸蜡才能更好的进行,从而得到优质的切片。 

组织脱水后,必须经过一种既能与乙醇相结合,又能溶解石蜡的溶剂,通过这种溶剂的媒介作用从而使石蜡浸入组织。这种溶剂使组织呈现出不同程度的透明状态,这个过程称为透明。二甲苯是最常用的透明剂,二甲苯为无色透明的液体,易挥发,折光率为1.497,透明力强,使用不当易使组织收缩变脆。 

组织经过脱水、透明后用石蜡、火棉胶、明胶等支持剂浸入组织内,是组织变硬并将组织包裹在内,有利于切片,这个过程称为浸蜡。石蜡是现代病理技术室使用最广泛的浸蜡剂,普遍应用的石蜡熔点为58-60℃。

四、组织包埋制作

组织块经过固定、脱水、透明和浸透剂(石蜡、火棉胶、树脂、塑料等)浸透,用包埋剂(石蜡、火棉胶、树脂、塑料等)包成块的过程称为包埋。组织块只有经过包埋后使组织达到一定的硬度和韧度,才有利于切成所需要的厚度。不同组织需要不同的包埋剂、不同的包埋方式和不同的要求。 

五、石蜡组织切片制作

病理组织经取材、固定、脱水处理,用石蜡包埋后制成蜡块,用切片机制作切片的过程称作为石蜡组织切片,也是现代病理诊断常用的切片方法。一般切片厚度为3-5μm,脑组织一般为6-8μm,有特殊要求的组织可切1-2μm,如需观察病变的发生、发展需做连续切片。由于石蜡包埋的组织块便于长期保存,因此石蜡切片仍是当今各种切片制作中最常用、最普遍的一种方法。 

六、苏木精伊红染色 

染色及染色的方法在我国公元前就发展得相当普遍,劳动人民首先发明了织物的染色方法,所用的染料是从植物、动物、矿物质中提炼出来的。纺织物品染色技术的进步,推动了生物学、组织学和形态学化学染色方法和技术的发展。

任何组织的切片,如果不进行染色,看不到组织的细微结构,看不到细胞核,更加无法分辨肿瘤的良恶性,不能向临床医师提供诊断依据,更不能为病人的治疗方案提供依据。所以染色在病理组织形态学的诊断、科学实验研究以及教学工作中具有重要的意义和实用价值。

七、封片、贴签

封片的主要意义分为:①保持组织染色后原有的透明状态,有利于医师镜下观察。②保持细胞核及胞质的染色形态。③染色的组织与外界空气隔绝,有利于长久保存。④有利于教学、科研及患者复读切片。

病理切片标签号码是用来标记病人手术切取的标本、活检标本及体液标本的一个代码。通过这个号码能查找的病史及全部资料,为病人的后续治疗提供依据。